Materiales y Métodos

Enfermedades al microscopio

      Como ya hemos indicado uno de nuestros objetivos es poner a disposición del profesorado técnicas que puedan realizarse con materiales caseros. Aunque en las páginas anteriores se muestran algunos detalles hemos creído conveniente crear una página en la que se detallen todos los aspectos necesarios para su realización. A continuación mostraremos imágenes y explicaciones de las mismas junto con un enlace a un documento PDF que recoge, a modo de cuaderno de laboratorio, todas las técnicas y experiencias realizadas. Incluye un enlace a otro documento anterior m´ñas completo respecto a los proyectos anteriores.
      Todos los materiales han sido adquiridos en comercios de la localidad, salvo el formol que lo compramos en Amazon.

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Fijación/inclusión en resina de poliéster.


     Para poder cortar, o en nuestro caso reducir el grosor mediante el lijado, es necesario que el material biológico esté embebido en un medio de cierta dureza, como es la parafina o en nuestro caso la resina de poliéster. Para ello son necesarios los siguientes pasos:

  1. Cortar las muestras a tamaño muy pequeño (a menor tamaño mejor penetrabilidad de las sustancias empleadas en el proceso).
  2. Fijación de la muestra con algún líquido, como el formol, que preserve las estructuras.
  3. Sustituir el agua del interior de la muestra por el medio de inclusión. Como el agua y el medio de inclusión no son miscibles es necesario realizar los siguientes pasos:
    1. Deshidratación. En varios pasos sustituiremos el agua por alcohol.
    2. Sustitución del alcohol por otro disolvente que sea miscible con el medio de inclusión, en nuestro caso acetona.
    3. Sustitución de la sustancia puente por el medio de inclusión.
  4. Preparación de bloques. Colocación de las muestras en moldes llenos del medio de inclusión.

Obtención de preparaciones.

  1. Desmoldar los bloques y fragmentar el bloque para separar las piezas que contenga.
  2. Tallado de la pieza de forma que la cara deseada presente la mayor superficie posible.
  3. Lijado de esa cara hasta aplanar, pulido y pegado al portaobjetos.
  4. Lijado con la ayuda de un taladro vertical hasta un grosor aproximado de 1-2 mm.
  5. Acabado de la muestra (lijado y pulido con lijas de agua de granulometría decreciente *).

 

 

Otras técnicas.
Cortado con sacapuntas, pegado con pegamento rápido y lijado, y aclarado de hojas.

 

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Información

Tinciones y buenas imágenes.

Técnicas de tinción no contaminantes e imágenes

Detección repilo latente:

Medio Cultivo verticilo:

Tinción de Gram:

Tuberculosis muestreo: