Los lactobacilos.

 

____Los lactobacilos son las bacterias encargadas de la fermentación de la aceituna en la forma de aderezo conocida como aderezo a la sevillana o entamado. La especie más común en la fermentación de aceitunas es Lactobacillus plantarum. El año pasado trabajamos con ellos, ya que preparamos las aceitunas que llevamos al stand para degustación. Para esta edición también estamos preparándolas, pudiendo realizar el seguimiento en la página dedicada al entamado.

OBJETIVOS:

DESARROLLO:

_____Vamos a dividir esta página en dos apartados: Investigaciones previas y Adaptación para la actividad del stand.

Investigaciones previas.

_____En la siguiente tabla iremos añadiendo nuestras aportaciones y las imágenes que vayamos obteniendo junto con los comentarios correspondientes.

Tenemos dos salmueras:

  • Una traída de la cooperativa “La Campiña”
  • Otra elaborada a partir de sal, agua y un inóculo de Lactobacillus.

Tomamos muestras de las dos salmueras.
     Introducimos las dos muestras en la centrifugadora, una frente a otra durante unos 5 minutos. Vamos aumentando la velocidad de ésta paulatinamente.

     Observamos los peles de microorganismos que se han formado en el fondo de los tubos de ensayo. Se espera que la mayoría de estos microorganismos sean Lactobacillus.


     Vaciamos los tubos de ensayo para quitar el exceso de agua y los agitamos para disolver el cúmulo de microorganismos.

     Tomamos muestras de los microorganismos y los observamos al microscopio.


Esta es una imagen obtenida de la muestra.
ESTERILIZACIÓN DE LAS PLACAS DE PETRI

ESTERILIZACIÓN DE LOS TUBOS DE ENSAYO

PREPARACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

Hemos preparado dos medios diferentes:

  • Medios líquidos:
    • Medio de caldo del puchero.
    • Medio a partir de aceitunas trituradas
  • Medios sólidos a partir de los medios líquidos.

     En el documento que se redactará al acabar el trabajo encontraremos todos los detalles en el apartado: Materiales y métodos.
     Hemos sacado una muestra de cada medio en dos tubos de ensayo y las hemos esterilizado al igual que el resto de tubos de ensayo.

Medios sólidos:

  • 3 placas de petri con el medio de puchero (C2, C6 y C7) y dos tubos de ensayo (C1 y C2).
  • 4 placas de petri con el medio de aceitunas trituradas (A1, A3, A4 y A5) y dos tubos de ensayo (A1 y A2).
SIEMBRA DE LACTOBACILOS EN MEDIOS SÓLIDOS
     Resultado de la siembra de Lactobacillus en medio de caldo de puchero.
     Imagen con más detalle de las colonias de microorganismos en el medio sólido de caldo de puchero.
     Este es el resultado de la siembra en un medio de cultivo sólido de extracto de aceitunas.

     Realizamos la tinción de Gram tomando la muestra de la salmuera nueva.

     Para más detalles ver apartado: Materiales y métodos en el documento final.
Los lactobacilos son Gram +.
     Teñidos solamente con violeta de genciana
     Las imágenes las hemos obtenido capturando las pantallas con un microscopio conectado a un ordenador.
     Esta es la webgrafía utilizada. La primera página es una presentación sobre la fermentación.




 

Trabajo completo (pdf)
El juego de la fermentación láctica.
Juego "Entamado y fermentación".

 

Adaptación para la actividad del stand.

 

1ª

     Una de las actividades que llevaremos a la feria será la observación directa de lactobacilos de salmuera. Realizaremos en el stand todos los preparativos (obtención, concentración por centrifugación, y montaje de preparaciones) para la observación de los lactobacilos en vivo. Estas preparaciones serán observables con un microscopio convencional o con un videomicroscopio.

Pulse sobre la imagen para ver el vídeo grabado en nuestro laboratorio.

2ª     Tendremos a disposición de nuestros visitantes la colección de placas de Petri completa para que puedan comprobar como se ha realizado nuestro trabajo.
3ª     También mostraremos los resultados de nuestras siembras en tubo inclinado.

 

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